PVDF膜即聚偏二氟乙烯膜（polyvinylidene fluoride）是蛋白質(zhì)印跡法中常用的一種固相支持物。PVDF膜是疏水性的，膜孔徑有大有小，隨著膜孔徑的不斷減小，膜對低分子量的蛋白結(jié)合就越牢固。硝酸纖維素膜又稱為NC膜， 在膠體金試紙中用做C/T線的承載體，同時也是免疫反應(yīng)的發(fā)生處。所以NC膜成為該試驗中最重要的耗材。那么PVDF膜與NC膜有什么區(qū)別呢？下面就請聽榮誠太湖塑業(yè)小編來給您介紹一下
　　
　　1. PVDF膜
　　
　　PVDF膜比較貴，但是做WB的“殺手锏”。與硝酸纖維素膜相比，PVDF膜在蛋白質(zhì)截留能力，機械強度和化學(xué)相容性上都更優(yōu)越的性能（Pluskal,et al.,1986)。市售硝酸纖維素膜的典型結(jié)合量是80-100μg/cm2,而PVDF膜結(jié)合量是100-200μg/cm2（而結(jié)合強度PVDF比硝纖膜強6倍?。５荘VDF膜最大的優(yōu)點不僅于此：更好的機械強度和化學(xué)耐受性使PVDF膜在各種染色應(yīng)用和多重免疫檢測中成為理想選擇；而且單個凝膠的泳道復(fù)本可用于多種目的，如考馬斯亮藍染色后切出條帶并進行N-末端測序、蛋白消化/肽分離/內(nèi)部測序和免疫檢測（Kurien,et al.,2003)。特別是需要做N端蛋白測序，在相當(dāng)“嚴酷”的清洗條件下，當(dāng)尼龍或者硝纖膜已經(jīng)降解的情況下PVDF膜依然保持本色，笑傲江湖。所以PVDF也是要做蛋白測序的唯一選擇。PVDF膜同樣分0.45um和0.2um的，后者孔徑小，對小分子蛋白有較好的攔截吸附，背景可能會比前者稍高。
　　
　　2. 硝酸纖維素膜(NC膜)
　　
　　硝酸纖維素膜是蛋白印跡最廣泛使用的轉(zhuǎn)移介質(zhì)，對蛋白有很強的結(jié)合能力，而且適用于各種顯色方法，包括同位素，化學(xué)發(fā)光（Luminol類）、常規(guī)顯色、染色和熒光顯色；背景低，信噪比高。NC膜的使用也很簡便，比如不需要甲醛預(yù)處理，只要在無離子水面浸潤排出膜內(nèi)氣泡，再在電泳緩沖液中平衡幾分鐘就可以了；比如NC膜很容易封閉，也不需要特別嚴謹?shù)那逑礂l件。轉(zhuǎn)移到NC膜上的蛋白在合適的條件下可以穩(wěn)定保存很長時間，不過要注意的是純的硝纖膜在比較脆，又容易卷，操作要小心，不適合用于需要多次重復(fù)清洗的用途——因為經(jīng)不起多次“折磨”。選擇硝纖膜時要注意的是選擇合適的孔徑，通常20KD以上的大分子蛋白用0.45um孔徑的膜，小于20KD的話建議選擇0.2um的，如果小于7KD的話最好選擇0.1um的膜。另外還要注意選擇純的NC膜——混有含醋酸纖維（CM）的NC膜結(jié)合力會有所降低。另外提醒一句：由于NC膜上結(jié)合的蛋白會因為一些去污劑而被代替，因此在封閉時最好使用較溫和的Tween20，而且濃度不要超過0.3%（據(jù)說0.05%效果最好）。